March 2024 (주)부경에스엠·신장대사물질측정검사시약,

수입체외진단의료기기
분류번호	J11020.01(2)

BÜHLMANN ACE Kinetic

[모양 및 구조]

1. 작용원리:  본 제품은 의료용분리방식임상화학자동분석장치 또는 이와 같은 기능을 가진 기기를 사용하여 사람의 혈청에서 안지오텐신 변환 효소 활동도(ACE activity)의 정량 측정하는 혈액검사용 시약이다. ACE는 안지오텐신 I을 안지오텐신 II로의 변환을 촉진한다. 효소는 합성 기질을 아미노산 유도체와 dipeptide로 분열을 매개한다. 이 분열 반응의 kinetic은 340nm에서 흡광도 감소 판독으로 측정된다. 환자 검체에서 U/L 단위의 최종 ACE 활동도는 측정된 보정 값에서 생성된 보정 곡선을 사용하여 결정된다.

2. 모양 및 구조 - 외형

1]  BÜHLMANN ACE Kinetic

본 제품은 보정물질, 대조물질 세트와 기질액으로 구성되어 있다.

(1) 외관사진

(1)         (2) ① 고농도   ② 저농도        (3)

2) 체외진단의료기기

번 호	명 칭		세부 구성	외관상 특징
1	보정물질(Calibrator)		단일	녹색 뚜껑의 유리바이알에 든 백색 동결건조물
2	대조물질세트 (Control Set)	고농도	단일	파란색 뚜껑의 유리바이알에 든 백색 동결건조물
		저농도	단일	하늘색 뚜껑의 유리바이알에 든 백색 동결건조물
3	기질액(Substrate)		단일	갈색 뚜껑의 갈색 HDPE 병에 든 투명한 액체

[원재료]

1. 보정물질(1바이알(2,2,3, 동결건조물질))

2. 대조물질세트-고농도, 저농도(1x2바이알(2x2, 2x2, 3x2, 동결건조물))

3. 기질액(1x26mL(2x13mL, 4x26mL, 3x100mL))

[사용목적] 본 제품의 사람의 혈청에서 안지오텐신 변환 효소 활동도(ACE activity)를 효소 검사법(Enzymatic Assay)으로 정량하는 체외진단분석기용시약이다.

[성능]

성능은 Roche cobas 6000 c501 장비에서 확인되었다.

번호

성능 항목

결과

1

정밀도

1) 재현성: 6.3 – 9.1% CV. 재현성은 CLSI 지침 EP05-A3에 따라 3대의 장비/로트 x 5일 x 5번의 반복 연구 설계를 사용하여 확립되었다. 40 U/L 이상 및 미만 검체에 대해 각각 15% CV 및 20% CV의 허용 기준을 적용했다. 테스트는 Roche c501, Roche c702 및 Beckmann Coulter AU 장비를 사용하여 2곳의 장소에서 수행되었다. 혈청 검체 6개가 검사되었다.

ID	평균 ACE 활성도[U/L]	n	수행 내		수행일자 간		lot/장비 간		전체
			SD	CV	SD	CV	SD	CV	SD	CV
12400	29.6	75	1.9	6.3%	0.0	0.0%	2.0	6.6%	2.7	9.1%
12401	46.9	75	1.5	3.3%	0.0	0.0%	3.3	7.1%	3.7	7.8%
12402	73.5	75	2.2	3.0%	0.0	0.0%	4.5	6.1%	5.0	6.8%
12403	121.5	75	4.0	3.3%	2.5	2.0%	6.1	5.0%	7.7	6.3%
12404	217.2	75	6.7	3.1%	5.6	2.6%	13.0	6.0%	15.7	7.2%
12405	310.3	75	13.6	4.4%	11.9	3.8%	11.4	3.7%	21.3	6.9%

2) 반복성: 0.8 – 3.0% CV

3) 실험실 내 정밀도: 1.7 – 3.7% CV

반복성 및 실험실 내 정밀도는 CLSI guideline EP05-A3에 따라 표준화된 20일 x 2번 수행 x 2회 반복 연구 설계로 설정되었다. 40 U/L 이상의 샘플에 대해 반복성 및 실험실 내 정밀도에 대해 각각 10% CV와 15% CV의 허용 기준을 적용했다. 40 U/L 미만 샘플의 경우 허용 기준은 20% CV였다. 혈청 샘플 6개가 검사되었다.

ID	평균 ACE 활성도[U/L]	n	수행 내		수행 간		수행일자 간		전체
			SD	CV	SD	CV	SD	CV	SD	CV
12850	28.2	80	0.9	3.0%	0.5	1.6%	0.4	1.3%	1.0	3.7%
12851	44.2	80	1.0	2.3%	0.3	0.8%	0.3	0.7%	1.1	2.5%
12852	68.5	80	1.0	1.5%	0.8	1.2%	0.7	1.0%	1.5	2.1%
12853	119.4	80	1.0	0.8%	1.4	1.1%	1.2	1.0%	2.0	1.7%
12854	213.9	80	3.0	1.4%	3.4	1.6%	2.3	1.1%	5.1	2.4%
12855	364.8	80	3.7	1.0%	5.2	1.4%	3.8	1.1%	7.4	2.0%

2

정확도/회수율

1) 정확도/회수율: 92.0 – 112.8%

ACE 활성 값이 BÜHLMANN ACE kinetic 측정 범위를 포함하는 6개의 혈청 샘플을 보정 물질에서 얻은 20.5 U/L ACE로 스파이크했다. 스파이킹은 샘플 부피의 10%에서 수행되었다. “Baseline” 샘플은 해당 부피 0.9% NaCl로 스파이크되었다. "Baseline" 및 "Baseline + 스파이크" 샘플은 4회 반복 측정되었다.

샘플 ID	12615	12618	12614	12558	3198532	3190624
Base 값 [U/L]	19.8	34.6	59.0	69.8	75.8	104.6
스파이크 값 [U/L]	20.5	20.5	20.5	20.5	20.5	20.5
기댓값 [U/L]	40.3	55.1	79.5	90.3	96.3	125.1
관측값 [U/L]	37.1	56.9	80.8	89.8	108.7	130.0
총 회수율 [%]	92.0	103.3	101.7	99.4	112.8	103.9

3

Sample carry-over

Sample carry-over는 CLSI guideline EP10-A2에 따라 설정되었다. Roche cobas 6000 c501 장비에서 ACE kinetic test를 수행했을 때, 통계적으로 유의한 carry-over가 감지되지 않았다.

4

민감도

1) 검출 한계 (LoD): 6.8 U/L

LoD는 고전적인 접근법을 사용하여 CLSI guideline EP17-A2에 따라 비 매개변수 분석을 사용하여 결정된 매개변수 분석 및 4.3 U/L LoB를 사용하여 설정되었다.

2) 정량 한계 (LoQ): 11.3 U/L

LoQ는 CLSI guideline EP17-A2에 따라 60개의 결정과 20% CV의 정밀도 목표에 따라 설정되었다.

5

직선성

1) 직선성: 4.3 - 534.9 U/L

BÜHLMANN ACE kinetic의 직선성은 CLSI guideline EP06-A에 따라 결정되었다. 활성도가 150U/L를 초과하는 샘플은 감소된 샘플 양을 사용하여 자동으로 재수행되었다. ±4 U/L 또는 ±10%의 직선성에서 최대 편차가 허용되었다.

6

Security Zone

이론적 ACE 활성도가 최대 541.2 U/L인 샘플은 검사의 측정 범위를 제한하지 않고 측정할 수 있다.

7

특이도

간섭 물질

간섭물질에 대한 BÜHLMANN ACE kinetic assay의 민감도는 CLSI guideline EP07-A2에 따라 평가되었다. 20%를 초과하는 결과의 편차는 간섭으로 간주되었다.

1) 경구약

다음 물질에서 간섭이 검출되지 않았다; Aspirin (0.65 mg/mL), Azathioprine (3.0 µg/mL), Chlorambucil (7.2 µg/mL), Cyclophosphamide (0.375 mg/mL), Eprosartan (0.36 mg/mL), Hydroxychloroquine (up to 0.06 mg/mL), buprofen (0.5 mg/mL), Losartan (0.09 mg/mL), Methotrexate (2.0 µg/mL), Prednisone (0.3 µg/mL).

2) 혈청 지수

triglycerides (2.24 mg/mL), conjugated bilirubin (0.06 mg/mL), unconjugated bilirubin (0.047 mg/mL), hemoglobin (1.19 mg/mL) 등의 농도에서 간섭이 검출되었다.

탁도가 있는 샘플을 짧은 원심분리(10분/12'000 xg)와 지질 함유 상청액 분리를 실시하였을 때 triglycerides에 의한 간섭은 관찰되지 않았다.

3) 혈장 샘플

리튬-헤파린 및 시트르산 튜브에 수집된 건강한 헌혈자의 샘플 결과를 사용 지침에 따라 수집된 동일한 기증자의 혈청 샘플로 얻은 결과와 비교했다. 편차는 Passing-Bablok 선형 회귀 분석과 Bland-Altman 분석을 사용하여 결정되었다.

매트릭스	N	Bland-Altman 분석			Passing-Bablok 회귀 분석
		평균 편차 (95% CI)	상한 LoA (95% CI)	하한 LoA (95% CI)	기울기 (95% CI)	절편 (95% CI)	r
리튬-헤파린 혈장	38	-1.1% (-4.5 to 2.3)	20.7% (14.9 to 26.6)	-23.0% (-28.8 to -17.1)	0.9 (0.8 to 1.0)	2.5 (0.2 to 5.4)	0.975
시트르산 혈장	44	-10.8% (-13.9 to -7.6)	8.1% (2.6 to 13.5)	-29.6% (-35.0 to -24.2)	0.8 (0.8 to 0.9)	1.7 (-0.7 to 4.4)	0.990

[사용방법]

1. 검체 준비 및 저장방법

1) 표준 혈청 채취 튜브에 혈액을 채취하여 용혈을 피하십시오.

2) 지방혈청을 피하기 위하여, 혈액 검체는 금식환자에서 얻어야만 한다.

3) 실험실의 표준 절차에 따라 혈청을 준비한다.

4) 겔 분리관(gel seperator tubes, SST)을 사용하여 혈청 분리를 수행할 수 있다.

5) 최소 200µL의 혈청 검체로 검사하는 것을 권고한다. 정확한 양은 장비 사용 참고 사항을 참조하십시오.

6) 저장: 혈청 샘플은 냉장 보관하지 않거나(28 °C까지의 온도) 2-8 °C에서 10일 동안 보관 가능하다. 더 오래 보관하려면 샘플을        -20°C 이하에 보관하십시오. –20°C 이하에서 샘플은 최소 7개월 동안 안정하며, 4회 이상의 동결/해동 사이클을 피해야 한다.

2. 검사 준비

(1) 시약

1) 보정물질: 2mL 탈이온수로 조제한다.

2) 대조물질세트: 2mL 탈이온수로 조제한다.

3) 기질액: 그대로 사용한다.

3. 검사과정

(1) 체외진단의료기기를 이용한 방법

의료용분리방식임상화학자동분석장치(측정파장: 340nm)의 장비 매뉴얼을 참고한다.

(2) 사용 참고 사항 / 검사 설치

1) BÜHLMANN ACE kinetic의 검사는 여러 임상 화학 분석기에서 사용된다.

2) 특정 기기에 대한 설치 및 분석을 설명하는 검증된 사용 참조사항은 요청 시 BÜHLMANN에서 제공한다.

3) 장비 설정, 유지보수, 작동 및 주의사항은 해당 장비 설명서를 고려해야 한다.

4) BÜHLMANN ACE kinetic은 수동 방식으로도 사용할 수 있다.

5) 절차 설명은 요청 시 BÜHLMANN에서 제공한다.

(3) 시약 준비

기질액은 그대로 사용하며, 필요한 양을 장비의 특정 병/카세트로 옮긴다.

(4) 보정 곡선 설정

1) 키트에 포함된 보정물질은 장비 메뉴얼에 따라 2 지점 보정 곡선을 설정하는 데 사용된다.

2) 보정 값은 로트에 따라 다르다.

3) 새로운 로트마다 새로운 보정을 수행한다. 그렇지 않은 경우 장비별 사용 참고 사항에 따라 주기적으로 보정을 수행한다.

4) 할당된 보정 값은 BÜHLMANN ACE kinetic 키트와 함께 제공된 QC 데이터 시트를 참조하십시오.

5) 오류없는 보정을 수행할 수 없을 시, BÜHLMANN 지원부에 문의하십시오.

(5) 결과

결과는 임상 화학 장비에서 자동으로 계산되며 U/L로 표시된다.

4. 결과판정

1) BÜHLMANN ACE kinetic 보정물질은 2 지점 보정 곡선을 생성하는 데 사용된다. 보정물질 값은 UV/VIS 분광 광도법과         FAPGG 기질의 정의된 Δε을 사용하여 할당된다. 값은 QC 데이터 시트에 보고된다. 보정물질 재료는 완충제 매트릭스에서      설치류 혈청 ACE를 포함한다. 제품 보정 물질의 결합 불확실성에 대한 95% 신뢰 구간은 5.0%보다 낮다.

2) Roche cobas 6000 c501 장비에서 설정된 ACE kinetic 검사의 분석 측정 범위는 11.3 - 200 U/L이며 임상 화학 장비에서 사용할 수 있는 자동 재실행 프로그램을 사용하여 500 U/L까지 추가로 확장할 수 있다.

5. 참고치: 정상성인(20-70세) 경우 20-70 U/l이다

1) 성인: 3개 독립된 연구에 참여한 스위스(n=80, 연령: 20 - 70), 독일(n=159, 연령: 18 - 64) 및 미국(n=327, 16 - 77)의 건강한      참가자에 대해 얻은 2.5 - 97.5 백분위수 값에 기초하여 BÜHLMANN ACE kinetic 참조값을 다음과 같이 설정했다.

20 – 70 U/L

2) 어린이: 독일에서 단일 연구에 참여한 건강한 소아 참가자(n=84, 연령: 0.5 - 18)에 대해 얻은 2.5 - 97.5 백분위수 값에           기초하여 BÜHLMANN ACE kinetic 참조값을 다음과 같이 설정했다.

33 – 112 U/L

6. 정도관리

1) 환자 검체를 실행하기 전에 포함된 대조물질을 매일 검사하여 보정 곡선의 유효성을 검사 한다.

2) 환자 검체에 대한 유효한 결과를 얻으려면, 대조물질 측정값이 QC 데이터 시트에 표시된 값 범위 내에 있어야한다.

3) 대조물질 값이 올바르지 않으면 새로운 대조물질을 사용하여 측정을 반복한다.

4) 대조물질 값이 계속 유효하지 않으면 검사를 재보정한다.

5) 유효한 대조물질 값을 재현할 수 없는 경우, 위에서 설명한 단계를 수행한 후 BÜHLMANN 지원부에 문의하십시오.

[사용시 주의사항]

1. 체외 진단용(전문가 사용) 외 사용을 금지한다.

2. 시험은 Good Laboratory Practice (GLP)에 따라 자격을 갖춘 담당자가 처리하는 것을 권유한다.

3. 기재된 성능은 대표장비(Roche cobas 6000 c501)로 평가된 것이므로, 타 장비 사용시 각 실험실에서 보유한 장비로 시험한 성능과 비교 후 사용해야한다.

4. 안전 주의사항

1) 사용하지 않는 용액은 지역 규정에 따라 폐기해야 한다.

5. 기술적 주의사항

1) 검사를 수행하기 전에 지침서를 주의 깊게 읽어야 한다. 시약이 사용 지침서에 자세히 설명되지 않은 조건에서 잘못 희석, 취급 또는 보관될 경우 시험 성능에 악영향을 미친다.

2) 라벨에 인쇄된 만료일 이후에는 구성 시약을 사용하지 않는다.

3) 시약을 여러 개 혼합하지 않는다.

4) 검사를 실행하기 전에 검체에 거품이 없는지 확인한다.

5) 시약, 대조물질, 보정물질 및 검체는 장비 보관 온도 또는 설명서대로 실온에서 사용할 수 있도록 평형을 유지한다. 동결건조 시약을 지시된 대로 재구성하고, 재구성된 시약을 사용하기 전에 잘 혼합한다.

6) 컨트롤이 증발되지 않도록 한다.

7) 모든 시약은 사용 전에 2-8°C에 보관한다.

6. 결과 판정상 주의 사항

1) 시험 결과는 환자의 임상 평가 및 기타 진단 절차에서 얻을 수 있는 정보와 함께 해석되어야 한다.

2) 혈청 ACE 활성도는 조사된 환자의 유전자형에 따라 크게 달라진다. 환자에 대해 얻은 이전  BÜHLMANN ACE kinetic 결과의 맥락에서 결과를 검토해야 한다.

3) ACE 활성도 시험은 Benazepril(Lotensin), Captopril, Enalapril(Vasotec)과 같은 ACE 억제제를 사용하여 고혈압 치료를 받은 환자에게 수행해서는 안된다. 안지오텐신 II 수용체 차단제(AT1-antagonists)를 함유한 고혈압 치료제에 대해서는 간섭이 검출되지 않았다.:Losartan and Eprosartan

4) 용혈, 황달, 지질혈증은 검사를 방해한다. 혈청 지수는 "간섭 물질" 섹션을 참조하십시오.

5) BÜHLMANN ACE kinetic은 혈청 샘플에 대해서만 유효성이 검사된다. 리튬 헤파린 또는 구연산염 튜브에 잘못 수집된 검체에 대해 연구실의 처리절차를 따른다. (자세한 내용은 혈장 검체 섹션 참조).

6) EDTA는 ACE 활성의 저해제이므로 EDTA 혈장은 BÜHLMANN ACE kinetic 검사에 함께 사용할 수 없다.

[포장단위]  제조원의 포장단위

[사용기간]

번호	명칭		개봉여부	보관조건	유효기간(제조일로부터)	비고
1	보정물질		미개봉	2~8℃	29개월	완제품
			개봉	2~8℃(냉장보관)	6개월	재구성 시약
			개봉	≤ 15°C	73일	장비 장착시
2	대조물질세트	고농도	미개봉	2~8℃	29개월	완제품
			개봉	2~8℃(냉장보관)	6개월	재구성 시약
			개봉	≤ 15°C	73일	장비 장착시
		저농도	미개봉	2~8℃	29개월	완제품
			개봉	2~8℃(냉장보관)	6개월	재구성 시약
			개봉	≤ 15°C	73일	장비 장착시
3	기질액		미개봉	2~8℃	29개월	완제품
			개봉	2~8℃(냉장보관)	6개월	재구성 시약
			개봉	≤ 15°C	73일	장비 장착시

[시험규격]

번호	시험항목	시험기준	시험방법
1	Assay Performance Test	제품내 포함되어 있는 대조물질 Normal 35.8-57.2 U/I* 이어야 한다 (lot-Specific).	정도관리물질(B-ACK-CONSET Control Normal 및 High)를 사용하여 SOP(QC-Instruction for ACE Kinetic Kit)에 따라 시험한다.
		제품내 포함되어 있는 대조물질 High 59.6-95.2 U/I* 이어야 한다(lot-Specific).

*해당 값은 lot 4275.1.1의 값이며, 표준물질 관련 절차서 SOP(QC-Instruction for ACE Kinetic Kit)에 따라 결정된다.

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수입판매원: (주)부경에스․엠	제조원: BÜHLMANN Laboratories AG

서울시 강남구 도곡로 205 원경빌딩 5층(역삼동)                     Baselstrasse 55, 4124 Schönenbuch,

Tel : (02) 516-7331                                                   Switzerland / Im Kirschgarten 29, 4124,

Schönenbuch, Switzerland

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